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                                          公司名稱:合肥萊爾生物科技有限公司
                                          聯系人:陳經理
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                                          產品名稱:植物生長素(IAA)ELISA試劑盒

                                          產品規格:48T/96T

                                          產品貨號:LE-Y1756

                                          產品報價:

                                          免費咨詢:0551-66107970

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                                          本試劑盒僅限于科研使用,請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。

                                          嚴格按照實驗說明書操作,并佩戴一次性手套和口罩。

                                          以下文字為產品簡介,詳情以說明書為準,可QQ或聯系在線客服索取。

                                          訂購方式:

                                          電話:15375214453  0551-66107970

                                          Q  Q:737388448    712380421

                                          檢測原理

                                          試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被激素脫落酸(ABA)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的激素脫落酸(ABA)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

                                          樣品收集、處理及保存方法



                                          1.  樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。

                                          2.  標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行。

                                          3.  植物萃取液或其它相關樣本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測。

                                          4.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

                                          自備物品

                                          1. 酶標儀(450nm)

                                          2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

                                          3. 37℃恒溫箱

                                          操作注意事項

                                          1.  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。

                                          2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

                                          3.  濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍,最終結果乘以5才是樣本實際濃度。

                                          4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

                                          5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

                                          試劑盒組成

                                          名稱

                                          96孔配置

                                          48孔配置

                                          備注

                                          微孔酶標板

                                          12孔×8條

                                          12孔×4條

                                          標準品

                                          0.3mL*6管

                                          0.3mL*6管

                                          樣本稀釋液

                                          6mL

                                          3mL

                                          檢測抗體-HRP

                                          10mL

                                          5mL

                                          20×洗滌緩沖液

                                          25mL

                                          15mL

                                          按說明書進行稀釋

                                          底物A

                                          6mL

                                          3mL

                                          底物B

                                          6mL

                                          3mL

                                          終止液

                                          6mL

                                          3mL

                                          封板膜

                                          2張

                                          2張

                                          說明書

                                          1份

                                          1份

                                          自封袋

                                          1個

                                          1個

                                          注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、1.25、2.5、5、10、20μmol/L

                                          試劑的準備

                                          20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

                                          洗板方法

                                          1.  手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

                                          2.  自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

                                          操作步驟

                                          1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

                                          2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

                                          3.  樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

                                          4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

                                          5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

                                          6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

                                          7.  每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

                                          結果判斷

                                          繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

                                           

                                          試劑盒性能

                                          1.  準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。

                                          2.  靈敏度:最低檢測濃度小于0.1μmol/L。

                                          3.  特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

                                          4.  重復性:板內、板間變異系數均小于15%。

                                          5.  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

                                          6.  有效期:6個月


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